子曾经曰过“知己知彼,百战不殆”,很多科研工作者对实验技能出神入化,但对所使用的试剂生产和应用知之甚少,导致买到不合适或假冒伪劣的产品,对时间和经费造成极大的损失浪费,所以选择合适的抗体,事半功倍。 一抗的选择 检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,为缩小抗体的选择范围选中合适的抗体,需要考虑的因素: 1. 实验应用的类型 一般抗体说明书都列出该抗体经试验...
近咱们技术部门的小姐姐接到好多用户朋友的询问,说“不了解正在研究的蛋白用哪个抗体合适”。 也有用户朋友经常询问“说明书中写着可以用于ICC/IF,那我做组织的荧光成像是可以的吧?” 其实在选择正确抗体的道路上,存在很多“坑”,只要成功避开,就可以选到适合您实验的抗体。 今天就来和大家分享一下“如何选择正确...
一、匀浆介质 一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。 二、细胞样本的前处理 1、细胞沉淀的收集: ① 悬浮细胞: 对于悬浮培养的细胞,直接通过离心收集细胞沉淀,将培养液在室温条件下100...
一、匀浆介质 一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。 二、组织匀浆的制备 1、取组织块(0.2g~0.5g)最少可到5~10mg在冰冷的PBS中漂洗,滤纸拭干,准确称重,放入5ml的匀浆管中。 2、按重量(...
一、匀浆介质的制备: 一般采用pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HCl, 1mmol/L EDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化钠溶液或直接用0.86%的生理盐水作为匀浆介质。 二、组织匀浆的制备 1、取组织块(0.1g~0.2g)最少可到2~5mg在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干...
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 标本的存放温度及时间,血清、血浆及细胞分离的方法步骤也是分析前影响检验结果的重要因素。抽血后,血细胞因代谢需要,要消耗掉部分营养成分,故对这些成分进行测定时,需及时地离心以分离掉细胞成分。 采血前个体的准备情况,如空腹时间的长短、采样时间的确定及采血时...
○ 样本收集 1、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 ① 不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 ② 抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低...
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干...